Einzelzellsortierung
Die Einzelzellsortierung ist eine Methode, um Zellen oder andere biologische Einheiten anhand von Fluoreszenzen oder morphologischen Besonderheiten zu isolieren. Dabei werden spezifische Proteine (Oberflächenmarker, intrazelluläre Proteine, Transkriptionsfaktoren, …) einer Zelle mit Hilfe fluoreszenzmarkierter Antikörper visualisiert.
Diese Methode beruht auf der Technologie der Durchflusszytometrie mit dem Zusatz, dass definierte Zellen aus der Population heraussortiert werden können. Die Zellen werden dabei einzeln in kleine Flüssigkeitstropfen verpackt, anhand unterschiedlicher Ladung in verschiedene Positionen abgelenkt und einzeln in Auffanggefäße sortiert.
Diese Technologie wird auch für die Sortierung von Zellen eingesetzt, die nach genetischer Modifikation fluoreszierende Proteine (GFP, RFP, …) exprimieren.
Ausstattung
BD FACSAria III
13+2 Kanäle
5 Laser:
• Blue (488 nm)
• Green-Yellow (561 nm)
• Red (633 nm)
• Violet (405 nm) or
near-UV (375 nm)
BD FACSAria II SORP
12+2 Kanäle
4 Laser:
• Blue (488 nm)
• Red (640 nm)
• Violet (405 nm)
• UV (355 nm)
BD FACSAria III
10+2 Kanäle
4 Laser:
• Blue (488 nm)
• Red (633 nm)
• Violet (405 nm) or
near-UV (375 nm)
Zubehör
Auffanghalterungen
Röhrchen (2-4 Populationen)
PCR Tubes
EppendorfTM Tubes (1,5ml, 2ml)
FACS Tubes
15ml Tubes
Individuelle Tubes
Platten (1 Population)
384-Well-Platten
96-Well-Platten
48/24/12/6/4-Well-Platten
Terasaki Platten
Objektträger
Individuelle Platten
Einstelloptionen
- Düsengrößen: 70 µm, 85 µm, 100 µm, 130 µm
Je nach Zell- bzw. Partikelgröße wird die Düse dem Sortiervorgang angepasst.
- Aerosol Management Option (AMO)
Das AMO ermöglicht das sichere Sortieren von biologischem Material, da Aerosole direkt abgesaugt werden.
- Temperatur: 4°C, RT
Je nach Zelltyp oder dem Sort folgender Applikation, kann die Temperatur für den Sortiervorgang optimiert werden.
- Index Sorting
Jede in ein Well abgelegte Zelle kann rückwirkend auf dem DotPlot identifiziert werden.